韩为东团队最新研究,PD-1的沉默会明显抑制CAR-T细胞的增殖能力

时间:2019-08-23 来源:www.phiphi-hotel.com

◆使用功能化CART作为模型细胞,研究PD1的长期部分抑制(不同于KO,不完全抑制,更类似于模拟体内抗PD1的作用)对T细胞的分化和发育及功能的影响;

◆抗PD-1治疗的提示,短期谈论肿瘤是一件好事。对于健全的免疫系统,长期怀疑“疲惫和垂钓”。

2019年8月12日/冯可访谈FENGClub/- 最近,人民解放军总医院生物治疗部的韩卫东团队发表了一本名为“PD-1沉默损害抗体免疫治疗杂志”的书。癌症(IF=8.7)文章“通过抑制增殖活性的嵌合抗原受体修饰的T细胞的肿瘤功能”报告了他们对PD-1功能的最新研究。

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▲解放军总医院生物治疗科韩卫东教授

关于PD-1,它被认为是在传统和主流认知中抑制T细胞活化和增殖的关键受体,并且阻断PD-1信号传导被认为增强T细胞的抗肿瘤功能。

然而,在这项研究中,研究人员发现,在稳定敲低PD-1表达后,CAR-T细胞在体内和体外的抗肿瘤功能并未显着增加,而是下降。进一步的研究表明PD-1的沉默显着抑制了CAR-T细胞的增殖。

如该文中的图4D和4E所示,在培养中,PD-1沉默CAR-T细胞的倍增时间可以是正常CAR-T细胞的15倍以上;如图4B和4G所示,在靶细胞刺激中同时,PD-1沉默CAR-T细胞的增殖能力仅为正常CAR-T细胞的约1/3-1/5。

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魏等人。癌症免疫治疗杂志

研究人员随后证实PD-1敲低不会诱导CAR-T细胞衰竭,但可以在一定程度上延迟失败。然而,PD-1的敲低显着加速了T细胞从原始状态向效应状态的分化。作者认为这可能是T细胞增殖受损的主要原因。

本文认为PD-1可能在维持T细胞的正常增殖和分化中起重要作用,PD-1的沉默通过抑制T细胞的增殖而损害其抗肿瘤功能。

文章发表后,本文第一作者魏建树博士联系了医生记者,就我们关心的几个问题提出了问题和讨论:

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冯克访谈:我们担心过去有几篇文章称,在用Crispr/Cas9技术敲除PD-1基因后,CAR-T细胞的抗肿瘤功能显着增强,这与本文的结论。您认为可能的原因是什么?

魏建树博士:首先,其他研究中使用的大部分靶细胞都被PD-L1过量表达。这种均一的高水平PD-L1在抑制正常T细胞功能方面非常有效。我们使用击倒的方法。在T细胞中肯定存在一些残留的PD-1表达。这部分残留的PD-1仍然可以显着抑制T细胞,并且敲除可以完全消除这种情况。抑制。

T细胞的抗肿瘤功能由多种因素组合决定,即使其增殖能力较弱,但如果完全消除PD-L1介导的免疫抑制,它将显示出更强的抗肿瘤活性。可能。

其次,PD-1实际上是一种相对复杂的受体。例如,它包含两个功能域,ITSM和ITIM。 ITIM区域在活化时也被磷酸化,但尚未发现其具有下游抑制因子。特征。因此,除了抑制T细胞活化之外,PD-1可以具有其他功能,并且该功能的这部分可以是背景水平并且不需要外源配体的参与。像这种更复杂的蛋白质,敲击和敲除具有不同的效果,并且已有报道。

冯科专访:关于PD-1功能的研究是一个非常热门的领域。我们注意到PD-1沉默对CAR-T细胞增殖的影响非常明显。为什么其他研究小组没有发现这种明显的现象?

魏建树博士:我们认为部分原因是每个人都有不同的关心。在许多关于转基因PD-1的文章中,我们主要针对转化,以便为将PD-1应用敲除到临床提供基础数据支持。在这种情况下,每个人都可能更关心整体抗肿瘤功能是否已经增强,并且不会关注其扩散。由于PD-1的表达是动态变化的,在通过CRISPR等技术敲除PD-1后,成功基因编辑的T细胞不能及时跟踪。因此,即使在PD-1敲除模型中,CAR-T细胞的增殖也受到抑制,并且这种现象相对难以观察到。

事实上,在我们的实验开始时,我们并未专注于研究的扩散。然而,我们使用的实验系统非常方便我们在视觉上跟踪PD-1沉默的CAR-T细胞,因为每个ZsGreen阳性细胞是CAR阳性的并且PD-1被击倒。

冯克访谈:由于阻断PD-1会抑制T细胞的增殖,这是否意味着PD-1抗体药物在临床上受到限制?

魏建树医生:PD-1抗体药物的临床效果尚无可争议,众多临床资料证明了这一点。在我们的实验中,我们发现PD-1抗体对T细胞的表型,增殖和分化没有任何显着影响。一种是外源性阻断,另一种是内源性阻断。两者之间的差异仍然很明显。这也可以间接地证明PD-1除抑制作用外还在维持T细胞的正常分化和增殖中起重要作用的可能性,并且该功能可能不需要配体参与。

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